如何將講實(shí)驗(yàn)室離心機(jī)訓(xùn)練成幫手

發(fā)布時(shí)間：

2021-02-04

概要：

實(shí)驗(yàn)室離心機(jī)?用對(duì)了是“幫手”，用錯(cuò)了就是“殺手”！就拿植物dna提取來(lái)說(shuō)，原理就是去掉植物細(xì)胞壁，細(xì)胞膜，質(zhì)體，線(xiàn)粒體，葉綠體然后剩下細(xì)胞核了，這就是我們需要的DNA。

　　實(shí)驗(yàn)室離心機(jī)用對(duì)了是“幫手”，用錯(cuò)了就是“殺手”！

　　就拿植物dna提取來(lái)說(shuō)，原理就是去掉植物細(xì)胞壁，細(xì)胞膜，質(zhì)體，線(xiàn)粒體，葉綠體然后剩下細(xì)胞核了，這就是我們需要的DNA。

　　通常采用機(jī)研磨的方法破碎植物的組織和細(xì)胞，由于植物細(xì)胞勻漿含有多種酶類(lèi)(尤其是氧化酶類(lèi))對(duì)DNA的抽提產(chǎn)生不利的影響，在抽提緩沖液中需加入抗氧化劑或強(qiáng)還原劑(如巰基乙醇)以降低這些酶類(lèi)的活性。在液氮中研磨，材料易于破碎，并減少研磨過(guò)程中各種酶類(lèi)的作用。

　　十二烷基肌酸鈉、十六烷基三甲基溴化銨簡(jiǎn)稱(chēng)為CTAB、十二烷基硫酸鈉簡(jiǎn)稱(chēng)SDS，等離子型表面活性劑，能溶解細(xì)胞膜和核膜蛋白，使核蛋白解聚，從而使DNA得以游離出來(lái)。再加入苯酚和氯仿等有機(jī)溶劑，能使蛋白質(zhì)變性，并使抽提液分相，因核酸(DNA、RNA)水溶性很強(qiáng)，經(jīng)離心機(jī)離心后即可從抽提液中除去細(xì)胞碎片和大部分蛋白質(zhì)。上清液中加入無(wú)水乙醇使DNA沉淀，沉淀DNA溶于TE溶液中，即得植物總DNA溶液。

　　雖然提取植物葉片的DNA比較簡(jiǎn)單，用下離心機(jī)再根據(jù)植物,找段基因的序列設(shè)計(jì)引物，再順勢(shì)PCR一下了,看看個(gè)能把這段基因擴(kuò)出來(lái)，整個(gè)過(guò)程其實(shí)需要用的到的設(shè)備并不多，重要的就離心機(jī)跟PCR儀器。

　　但是這里面需要注意的細(xì)節(jié)有很多，比如：

　　使用實(shí)驗(yàn)室離心機(jī)的注意事項(xiàng)：

　　1. 離心機(jī)在預(yù)冷狀態(tài)時(shí)，離心機(jī)蓋必須關(guān)閉，離心結(jié)束后取出轉(zhuǎn)頭要倒置于實(shí)驗(yàn)臺(tái)上，擦干腔內(nèi)余水，離心機(jī)蓋處于打開(kāi)狀態(tài)。

　　2. 轉(zhuǎn)頭在預(yù)冷時(shí)轉(zhuǎn)頭蓋可擺放在離心機(jī)的平臺(tái)上，或擺放在實(shí)驗(yàn)臺(tái)上，千萬(wàn)不可不擰緊浮放在轉(zhuǎn)頭上，因?yàn)橐坏┱`啟動(dòng)，轉(zhuǎn)頭蓋就會(huì)飛出，造成事故！

　　3. 轉(zhuǎn)頭蓋在擰緊后一定要用手指觸摸轉(zhuǎn)頭與轉(zhuǎn)蓋之間有無(wú)縫隙，如有縫隙要擰開(kāi)重新擰緊，直至確認(rèn)無(wú)縫隙方可啟動(dòng)離心機(jī)。

　　4. 在離心過(guò)程中，操作人員不得離開(kāi)離心機(jī)室，一旦發(fā)生異常情況操作人員不能關(guān)電源(POWER），要按STOP 。在預(yù)冷前要填寫(xiě)好離心機(jī)使用記錄。

　　5. 不得使用偽劣的離心使管，不得用老化、變形、有裂紋的離心管。

　　6. 離心機(jī)套管底部要墊棉花或試管墊。

　　7. 電動(dòng)離心機(jī)如有噪音或機(jī)身振動(dòng)時(shí)，應(yīng)立即切斷電源，即時(shí)排除故障。

　　8. 離心管必須對(duì)稱(chēng)放入套管中，防止機(jī)身振動(dòng)，若只有一支樣品管另外一支要用等質(zhì)量的水代替。

　　9. 啟動(dòng)離心機(jī)時(shí)，應(yīng)蓋上離心機(jī)頂蓋后，方可慢慢啟動(dòng)。

　　10. 分離結(jié)束后，先關(guān)閉離心機(jī)，在離心機(jī)停止轉(zhuǎn)動(dòng)后，方可打開(kāi)離心機(jī)蓋，取出樣品，不可用外力強(qiáng)制其停止運(yùn)動(dòng)。

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　　使用PCR儀器的注意事項(xiàng)：

　　(1)PCR儀使用的環(huán)境要恒定，工作環(huán)境的溫度不能過(guò)高或過(guò)低，最好在用空調(diào)的房間使用，有些PcR儀有溫度保護(hù)程序，在過(guò)低的溫度下機(jī)器不能啟動(dòng)。

　　(2)電源要穩(wěn)定，工作的電壓不能波動(dòng)過(guò)大，波動(dòng)過(guò)大會(huì)造成電子器件損壞，一般建議將PcR儀電源接于穩(wěn)壓電源上。

　　但是要注意的是，不論是離心機(jī)還是PCR儀器，使用前都要詳細(xì)閱讀使用說(shuō)明書(shū)，遇到不能解決的問(wèn)題不要隨意拆卸機(jī)器，應(yīng)該讓生產(chǎn)廠(chǎng)商負(fù)責(zé)售后服務(wù)的專(zhuān)業(yè)工程師進(jìn)行處理。

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